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日本对虾(Penaeus japonicus)性腺差异表达基因GD13之cDNA5’端克隆


□ 张焦平 张子平 邹志华 王艺磊

  摘要:采用基于SMART(Switching Mechanism At5’end of RNA Transcript)原理的cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA ends:RACE),对日本对虾性腺差异表达基因cDNA’5端进行克隆,即在逆转录过程中通过SMARTIIoligo的介导,在cDNA第1条链的3’端接上接头,然后根据已知序列设计的基因特异性引物(GSP1和GSP2)和接头引物(USM和NUP)进行Nested-PCR特性异扩增,并对特异产物进行克隆和序列分析,最终获得全长cDNA序列。测序结果表明,在卵巢内表达最高于精巢的GD13基因全长为656bp,编码164氨基酸,经NCBI检索,此基因与文昌鱼、家鼠的核糖体蛋白L24及黄牛的核糖体蛋白L30氨基酸序列同源性分别高达58%、56%和56%,可断定该基因为编码日本对虾核糖体蛋白L24亚基的基因。为进一步认识对虾生长发育和繁殖的调控机制奠定基础。
  关键词:日本对虾;性腺;GD13;SMART-RACE;cDNA克隆
  中图分类号:Q344 文献标识码:A
  

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