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2种病原菌感染海鳗后外周血白细胞的病理变化


□ 谢嘉华 袁建军 王立萍 杨儒明

  摘要:用鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)分别感染海鳗(Muraenesoxcinereus),48 h后取其外周血液,瑞-吉(Wright-Giemsa)氏染色,光镜下观察,同时对其外周血液中的免疫细胞数量变化进行测定。鳗弧菌和嗜水气单胞菌感染组的单核细胞的伪足样突起与对照组比较明显增多,胞质内空泡增多、变大,数量明显增多,差异极显著;嗜中性粒细胞核多呈长杆状,数量与对照组比较明显增多,差异极显著;淋巴细胞伪足样突起明显,中、大型淋巴细胞较多,数量与对照组相比明显减少,差异极显著。血栓细胞的数量明显下降,差异极显著。
  关键词:海鳗;外周血白细胞;病理变化
  中图分类号:Q942 5 文献标识码:A 文童编号:0250-3263(2006)05-88-04
  血液是动物体内的一种重要体液,也是鱼体内一项重要的生理生化指标,血液内各种免疫细胞能对外界环境和动物体本身生理状态的变化产生反应,因而是机体免疫的重要成分。关于鱼类血液细胞的形态学研究,国内外已有不少报道,但是对于其外周血细胞在病原菌感染后病理变化的资料却很少,尤其是海洋鱼类。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)与嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)均为常见细菌类群,广泛分布于自然界各种水域,目前已成为我国水产养殖动物的主要病原菌之一,严重危害了水产养殖业的发展。本研究在海鳗正常外周血细胞形态特征观察的基础上,用鳗弧菌和嗜水气单胞菌分别感染海鳗(Muraenesoxcinereus),研究并分析海鳗外周血液中免疫细胞
  
  
  3 讨 论
  
  鱼类免疫系统是鱼体内执行免疫防御功能的机构,包括免疫组织、免疫细胞和体液免疫因子三大类。凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞均称为免疫细胞,免疫细胞分为两大类:一类是淋巴细胞,主要参与特异性免疫反应;另一类是吞噬细胞,主要参与非特异性免疫反应。鱼类免疫细胞主要存在于免疫器官和组织以及血液与淋巴液中。
  单核细胞和粒细胞(包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)是鱼类吞噬细胞的主要组成成分。鱼类吞噬细胞又是组成非特异性防御系统的关键成分,尤其是在抵御病原生物感染中发挥着重要的作用。单核细胞和粒细胞等免疫细胞一方面可以破坏和降解血液及各器官与组织中的病原体:另一方面又会被活化并产生更多的抗病因子。
  单核细胞能进行活跃的变形活动,具有较强的吞噬能力,可通过伪足样胞突捕捉并融合外来物质以及自身的衰老细胞,进行吞噬消化。当机体发生急性炎症时,幼单核细胞能迅速增殖发育,产生速率提高50%左右。单核细胞还是重要的“抗原介绍细胞”。经鳗弧菌和嗜水气单胞菌感染后,海鳗外周血液中单核细胞数量均有极显著的上升,出现了少量幼稚的单核细胞,同时细胞形状变化较大,胞突增加,胞内有一些大液泡和吞噬物,个别还看到被吞噬进去的血栓细胞,表明在病原菌感染后的较短时间内,造血器官加速了单核细胞的增殖发育和释放,使单核细胞数量迅速增加且吞噬能力增强,能对血液中的菌体和衰老细胞进行活跃的吞噬活动,这三周玉等的结果一致。此外,在血涂片中还观察到少量开始解体的单核细胞,推测随着感染时间的延长,单核细胞的数量因吞噬细菌后解体,而呈下降趋势,这与胡成钰等、suzukl的研究结果一致。
  鱼类的粒细胞包括嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。在海鳗外周血中,嗜中性粒细胞占粒细胞中的大多数,嗜酸性粒细胞所占比例非常小,嗜碱性粒细胞在血涂片上很难找到,故本文主要研究嗜中性粒细胞在感染后数量上的变化。嗜中性粒细胞数量多,功能活跃,因此也是鱼类十分重要的非特异性免疫细胞。弧菌和气单胞菌感染鱼后都会出现出血性溃疡现象,气单胞菌还会引起败血症,而这些均将导致嗜中性粒细胞的增加。研究也表明,在鱼类腹腔中注入脂多糖、佐剂或接种病原生物后,其血液中嗜中性粒细胞的数量将会显著增加。本研究中海鳗经鳗弧菌和嗜水气单胞菌感染48h后,嗜中性粒细胞的数量与对照组比较有极显著的增加,这进一步证实了前人的结论。
  淋巴细胞是鱼体内参与特异性免疫反应的免疫细胞,鱼类的淋巴细胞也像高等脊椎动物那样能被抗原激活而产生相应的抗体和淋巴因子,其中T淋巴细胞还具有直接杀伤细胞的作用。但是淋巴细胞受抗原作用后的应答除正反应即激活外,还有负反应即麻痹。呈负反应时,淋巴细胞处于麻痹状态甚至死亡。Evenberg通过对鱼体注射产气单胞菌,对血液防御病理进行研究后认为,鱼的发病是由于鱼体本身免疫机能受抑制而成,产生鱼类免疫抑制作用的细胞是T细胞群。本研究中,海鳗经鳗弧菌和嗜水气单胞菌感染48h后,外周血液中的淋巴细胞数量表现出显著减少,差异极显著,推测是由于免疫抑制作用导致血液淋巴细胞数量的减少而对疾病的敏感性加强。
  血栓细胞是鱼类中具有凝血作用的细胞,相当于哺乳类的血小板。海鳗经鳗弧菌和嗜水气单胞菌感染后,全身多种器官出现充血或出血,同时观察到血栓细胞被单核细胞吞噬的现象,这可能与其外周血中血栓细胞的数量显著下降相关。
  注:“本文中所涉及的表格、注解、公式等请以PDF格式阅读原文。”

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