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针刺血清对体外培养破骨细胞数量的影响


□ 赵英侠 王 静等

针刺血清对体外培养破骨细胞数量的影响
赵英侠 王 静等

  [摘要]目的:探讨针刺抑制骨吸收的细胞学机制。方法:40只12月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、针刺预防组和针刺治疗组。针刺预防组和针刺治疗组分别在造模术后的3 d、3个月开始针刺。取“肾俞”“脾俞”“足三里”“大椎”。自新生SD大鼠四肢长骨分离破骨细胞,接种于24孔培养板中,加入含10%上述各组大鼠血清的培养液培养48 h后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色并计数TRAP(+)多核细胞数。结果:与假手术组比较,模型组TRAP(+)多核细胞数明显增加(P<0.01);与模型组比较,针刺预防组和针刺治疗组TRAP(+)多核细胞数明显减少(P<0.05)。结论:针刺血清能够减少破骨细胞的数量,预防组和治疗组之间的作用无统计学差异。
  [主题词]绝经后期;骨质疏松/针灸疗法;破骨细胞/针灸效应;体外发生
  
  绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMO)是绝经后妇女常见的骨代谢性疾病,因其引起骨痛、骨折等并发症,严重影响了绝经后妇女的健康和生存质量,近年来日益受到广泛重视。针灸学者根据“肾主骨”及“肾为先天之本,脾为后天之本”等中医基础理论,并结合骨质疏松症“多虚多瘀”的特点,以补肾健脾、活血通络为治疗原则选穴处方治疗绝经后骨质疏松症取得了较为满意的疗效,但对针刺作用的细胞学机制了解甚少。本课题组以往在体实验研究结果显示,针刺可以改善去除卵巢大鼠尿液中与骨吸收相关的生化指标。在上述研究基础上,本课题组采用体外破骨细胞培养技术,并借鉴血清药理学方法,进行了针刺血清对体外培养破骨细胞数量影响的离体实验研究,目的是进一步探讨针刺抑制骨吸收作用的细胞学机制。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 材料
  (1)实验动物:清洁级12月龄SD雌性大鼠,体重(407.25±9.26)g(用于制备针刺血清)和新生(1日龄)SD大鼠(用于分离培养破骨细胞),上海西普尔一必凯实验动物有限公司提供[合格证号:SCXK(沪)2003-0002]。
  (2)主要试剂和仪器:DMEM培养基(Gibco公司产品),胎牛血清(Hyclone公司产品),萘酚ASBI磷酸钠(Sigma公司产品),二甲基二酰胺(Gen-view公司产品),副品红(上海化学试剂公司产品),CO2培养箱(德国Heraeus公司生产),超净工作台(上海净化设备厂生产),荧光倒置相差显微镜(O-lympus)。 ......

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摘自:中国针灸
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