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天合保肾合剂对糖尿病肾病大鼠血管内皮功能的影响


□ 严仲庆 何敏尔 张 菁 范 铧 沈伟钢 朱声宏 胡松春 杜洪乔 章国琳 郑 凯 赵玉娟

  摘要 目的:探讨天合保肾合剂对糖尿病肾病(DN)大鼠血管内皮功能的影响。方法:大鼠经背部切除单侧肾,2周后以链尿佐菌素(STZ)尾静脉注射诱导DN模型,观察天合保肾合剂高、中、低剂量组对DN大鼠肾组织血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素(ET)、血小板活性指标血浆血栓素B2(TXB2)与6-酮-前列腺F1α(6-K-PGF1α)含量影响。结果:天合保肾合剂各剂量组均能够降低DN大鼠肾组织VEGF、ET、血浆TXB2水平,升高血浆6-K-PGF1α水平,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论:天合保肾合剂能够降低肾组织VEGF、ET水平及TXB2/6-K-PGF1α比值,改善DN大鼠的血管内皮功能障碍。
  
  关键词 天合保肾合剂 糖尿病肾病 血管内皮功能 大鼠
  
  糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一,其发病机制极其复杂,众多研究资料证明糖尿病血管内皮功能损伤是糖尿病血管病变的始动环节及病理生理基础。天合保肾合剂是我院中西医结合肾病中心研制的纯中药制剂,经多年临床观察表明,该方不但能降低血糖、血脂、减少尿蛋白的排泄,还能明显降低血肌酐、尿素氮,延缓糖尿病肾病的进展。本研究用单侧肾脏切除及链尿佐菌素(STZ)尾静脉注射诱导DN大鼠模型,观察具有温肾益气、解毒活血、疏肝泻浊功效的天合保肾合剂对DN大鼠血管内皮功能的影响,以探讨其作用机制。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 动物:选用纯系的雄性SD大鼠,体重200~250g(由浙江中医药大学动物实验中心提供)。
  1.2 药品与试剂:天合保肾合剂系由中药柴胡、半枝莲、生黄芪、附子、黄芩、海藻、地鳖虫、黄连、土茯苓、水蛭组成,制成实验用浓缩水煎剂(每1ml含生药1.5g),药材全部购于胡庆余堂药店;卡托普利片由浙江得恩德制药有限公司生产提供,批号0608115;STZ,sigma公司;VEGF批号:RT-110371,ET批号:RT-110371,TXB2批号:RT-110371,6-K-PGF1α批号:RT-110371,上述试剂盒均由美国进口;肝素钠注射液批号:0607117,由江苏万邦生化医药股份有限公司生产提供。
  1.3 主要仪器:酶标仪(RS-232C);TGL-16G常温高速离心机,湖南星科科学仪器有限公司;电子精密天平(AR2130型),奥豪斯国际贸易有限公司;HR-231CRY冷藏冷冻箱,杭州华日电冰箱有限公司。
  1.4 模型制作:大鼠腹腔注射3%戊巴比妥钠进行麻醉,经背部切口切除右肾后缝合伤口,连续3天肌肉注射青霉素钠。14天后将大鼠禁食16小时,正常组注射等量枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液,其余各组大鼠尾静脉一次性注射STZ(55mg/kg)建立动物模型[1]。5天后大鼠眼眶静脉丛采血测血糖,血糖浓度大于16.7mmol/L为造模成功。 ......
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