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红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对大鼠肺纤维化的干预作用


□ 陈小囡 田菊霞 陈 河 徐小冬 朱婉萍 王灵均

  摘要 目的:观察红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对实验性大鼠肺纤维化的干预作用。方法:大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组和巴卡亭Ⅲ组,通过气管内注射博莱霉素(BLM)复制肺纤维化模型,于造模后第2天治疗组开始给药,给药后第14天处死大鼠,取肺组织,行HE染色,并行免疫组化细胞外信号调节酶(ERK1)测定。结果:巴卡亭Ⅲ能减轻大鼠肺泡炎症及肺纤维化程度(P<0.01),并能减少ERK1的表达。结论:巴卡亭Ⅲ对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的干预作用。
  
  关键词 红豆杉 巴卡亭Ⅲ 博莱霉素 肺纤维化 大鼠
  基金项目:浙江省教育厅计划项目红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ干预肺纤维化的实验研究,编号:0686Xp55
  
  特发性肺纤维化(IPF)是慢性间质性肺病原因不明类中的一种,也是以普通型间质性肺炎为特征性病理改变的慢性炎症性肺疾病,其确切的发病机制目前尚不十分清楚,其发病率及死亡率也逐年提高,目前临床上仍以糖皮质激素和免疫抑制剂治疗为主[1],但它仅对20%的IPF患者有效,且副作用大。因此,寻找治疗IPF的其它有效方法是当务之急。巴卡亭Ⅲ与紫衫醇同为红豆杉的活性成分,且结构相似,而后者具有独特的抗癌和抗纤维化机理已成为研究热点,作为紫衫醇合成的前体化合物,迄今为止国内外对于巴卡亭Ⅲ抑制肺组织纤维化的研究尚未见报道。本试验试图应用博莱霉素A5诱导大鼠肺纤维化模型,通过对给予巴卡亭Ⅲ后的大鼠细胞外信号调节激酶(ERK1)信号传导通路的活化与分布情况的测定以及大鼠肺脏病理组织学检查,观察巴卡亭Ⅲ对大鼠特发性肺纤维化的抑制作用,从而为进一步寻找治疗特发性肺纤维化的有效途径提供实验依据。
  1 材料与方法
  1.1 实验动物:雄性3~4周龄SD大鼠,体重180~200g,SPF级,浙江省中医药研究院动物实验中心提供。
  1.2 试剂:博莱霉素A5(BLMA5):天津太河制药有限公司提供,批号:060201;巴卡亭Ⅲ制剂:实验用巴卡亭Ⅲ乳剂,浙江省中医药研究院提供;免疫组化检测试剂盒EnVisionTM,丹麦DAKO公司;EKR1单克隆抗体,美国Santacruz公司;DAB显色液,丹麦DAKO公司。
  1.3 实验方法:实验方法如下。
  1.3.1 实验动物分组:80只SD大鼠随机抽取60只进行模型建立,造模后随机分为3组:模型组、强的松组、巴卡亭Ⅲ组,每组20只,余20只未造模大鼠设为空白组。
  1.3.2 动物模型建立:①麻醉:按40mg/kg计算,用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉;②颈前皮肤75%酒精消毒,沿颈前正中切开约2cm大小的切口,逐层钝性分离暴露气管,然后用1ml注射器抽取博莱霉素A5溶液,沿气管软骨之间斜向下刺入迅速注射博莱霉素A5溶液(按5mg/kg),立即将大鼠直立,缓慢摇动数十秒钟,立即消毒,缝合。 ......
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