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乳酸菌表达质粒的构建


□ 倪伟明 黄路标 王荫榆 刘国元 张伯生 任大明

  摘 要:粪肠球菌是乳酸菌的一个属。采用生物信息学方法,预测了粪肠球菌AS1.2984基因组中乳酸脱氢酶和三磷酸甘油醛脱氢酶的组成型启动子序列。设计引物通过PCR扩增得到这2段启动子序列,并克隆到乳酸菌大肠杆菌穿梭质粒pNZ8037上,在启动子下游接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建乳酸菌的组成型蛋白表达质粒。通过电转化将上述改造的pNZ8037质粒导入粪肠球菌中,在共聚焦显微镜中可以观察到绿色荧光蛋白的表达。在乳酸菌MRS培养基中加入乳酸、盐酸、氢氧化钠等试剂,发现可以调节绿色荧光蛋白的表达量。
  关键词:乳酸菌;粪肠球菌;启动子;pNZ8037;绿色荧光蛋白;共聚焦;口服疫苗
  中图分类号:Q782
  文献标识码:A
  文章编号:0427-7104(2004)06-1056-05

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