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针刺与埋线干预对抑郁大鼠中枢单胺类神经递质的影响


□ 徐世芬 庄礼兴 唐纯志

  文章编号:0255-2930(2007)06-0435-03
  中图分类号:R246.6 文献标识码:A
  [摘要] 目的:探讨针刺与埋线治疗抑郁症的疗效差异和作用机制。方法:将32只成年雌雄各半的SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和埋线组,每组8只。后3组采用孤养和长期不可预见的中等强度刺激应激造成抑郁大鼠模型,同时针刺组和埋线组开始治疗,周期21天。采用高效液相色谱系统——电化学检测器检测大鼠脑内去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的含量。结果:与正常组相比,模型大鼠下丘脑和海马的NE、5-HT和DA均有明显下降(P<0.05,P<0.01)。针刺与埋线均可使脑内的神经递质有不同程度的提高,埋线组在提高下丘脑的5.HT和DA以及海马的DA方面更具优势,但两组间比较差异无显著意义。结论:针刺与埋线对抑郁模型大鼠均有效,其作用机制具有相似性,均可通过调节中枢单胺类神经递质而发挥治疗作用。
  [主题词] 埋线;抑郁症/针灸疗法;单胺氧化酶/代谢;神经递质类/代谢
  
  研究表明,抑郁症是脑内单胺类递质,如去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)等功能不足所致。NE和5-HT等神经递质的功能紊乱与多种抑郁症状有关,如NE减少可引起注意力和记忆力减退,社会活动减少,觉醒状态改变;5-HT减少可导致冲动控制能力减弱,性欲减退,食欲下降,易激惹。针灸介入抑郁症的治疗已有近20年历史,取得了明显的疗效,临床上治疗方法也越来越多。但是,对于不同方法对中枢单胺类递质的影响,尚缺少深入的研究。本实验旨在观察慢性应激抑郁模型大鼠中枢单胺类神经递质的变化,以及针刺和埋线两种不同方法干预对它们的影响,现将结果报告如下。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 材料
  (1) 实验动物
  成年SD大鼠,体重220~290g,雌雄各半(由广州中医药大学动物中心提供,动物合格证号:2005A008,SPF级)。
  (2) 试剂与仪器 试剂:NE、DA、5-HT为美国Sigma公司产品;乙腈购自德国Merk公司,其余试剂均为市售分析纯。仪器:DIONEX Summit高效液相色谱仪(美国DIONEX公司),Chromeleon色谱工作站(美国DI-ONEX公司),HPl049A电化学检测器(美国安捷伦公司),RC5C低温高速离心机(美国杜邦公司),PHS-2C精密酸度仪(上海理达仪器厂)。
  
  1.2 方法
  (1)动物分组
  首先用Open-field法进行行为学评分,选择得分相近的32只大鼠,适应性喂养7d后,随机分为正常组、模型组、针刺组和埋线组,每组8只。正常组每笼饲养4只,雌雄分开。
  
  (2)模型制备
  按照文献方法进行抑郁症模型大鼠的复制。模型组、针刺组和埋线组每笼饲养1只,接受21天各种不同的应激刺激,包括断水24h;断食24h;夹尾1min;10℃冰水游泳5min;摇晃每秒1次,5min;昼夜颠倒;电击足底,电压50mV,每5 s刺激1次,间歇5s,共刺激10次。每天随机选择一种刺激,每种刺激平均使用3次,共21天。
  
  (3)治疗方法
  在给予大鼠各种不可预知的应激刺激同时,除模型组外,各治疗组开始治疗。针刺组于每日应激刺激前1h进行治疗,根据《实验针灸学》大鼠穴位定位方法取穴,选取“百会”“心俞”“肝俞”。穴位常规消毒,选用华佗牌0.25mm×25mm针灸针进行针刺。“百会”向尾部斜刺,进针深度约为2mm,“心俞”“肝俞”(左右两侧穴位交替使用,每次取单侧)向尾部呈45°角斜刺5mm,每穴均匀捻转刺激30s,留针15min。每日1次,共21次。
  埋线组于应激刺激前1h进行治疗,取穴同针刺组,穴位常规消毒,用改良简易注线法,取一次性医用7号注射针头作套管,直径0.30 mm、长50mm不锈钢毫针(剪去针尖)作针芯。将“0”号医用羊肠线剪成0.5cm线段若干,浸泡在75%的酒精内备用。将针芯退出少许,羊肠线放人针头内,垂直穴位快速进针后稍做提插,推动针芯将肠线留于穴内。第1天、第7天和第14天进行埋线,共3次。
  
  (4)取材方法
  治疗21d后,将全部大鼠均快速断头,剥离全脑,于冰浴下迅速分离出海马和下丘脑,称重后置Eppendorf管中,保存于-70℃的冰箱中待测。
  (5)测定方法
  将各组海马、下丘脑分别置于玻璃匀浆器中,加入2%三氯乙酸溶液(预冷至4℃)500μL,温和匀浆,匀浆液用吸管小心转移入离心管中,用200μL磷酸二氢钠(Nail2P04)溶液[0.33tool/L,pH6,内含0.5mmol/L乙二胺四乙酸二钠(NazEDTA)]荡洗匀浆器,洗液并入离心管,混旋均匀,低温高速离心(4℃,15000r/main),取上清液50μL进行神经递质测定,以μg/g计算。
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